水牛HSD17B1基因克隆分析及其真核表达载体构建

为了阐明水牛17β-羟类固醇脱氢酶1 (17 beta-hydroxysteroid dehydrogenase 1,HSD17B1)基因对水牛繁殖性能的影响,本试验采用了3'-RACE克隆获得HSD17B1基因,并对其核苷酸序列和蛋白质序列进行了生物信息学分析,通过构建其真核表达载体并转染293T细胞验证所构建载体的准确性。结果表明,水牛HSD17B1基因编码区长954 bp,3'-UTR区长58 bp,编码317个氨基酸。BLAST分析显示水牛HSD17B1核苷酸序列与牛、绵羊、猪、马、犬、非洲象和人的相似性分别为100%、100%、92%、94%、87%、87%和87%,系统进化树分析结果表明,HSD17B1基因在不同物种及进化的过程中具有高度保守性。蛋白质分析结果表明HSD17B1蛋白呈弱酸性,无信号肽,亚定位于细胞质,存在type1_17beta-HSD-like_SDR_c、PRK05993、LPOR和FabG等结构域。试验成功构建了水牛HSD17B1基因真核表达载体pEGFPN1-HSD17B1,转染293T后,产生较强的绿色荧光信号,表明能够形成HSD17B1-EGFP融合蛋白。水牛HSD17B1基因的克隆及其真核表达载体的成功构建,为今后阐明HSD17B1基因在水牛卵泡及胚胎发生过程中的作用及分子机制奠定了理论基础。     

AtDME1化学诱导表达载体的构建及其瞬时表达

以拟南芥去甲基化转移酶基因DME1为目的基因,采用酶切、连接和重组反应的方法构建了以17-β-雌二醇为诱导剂的植物表达载体p ER8-DME1。将其转入农杆菌LBA4404菌株中,通过烟草瞬时表达技术,对该载体的诱导表达特性进行了研究。q PCR结果表明,较低浓度的17-β-雌二醇处理能够有效调控p ER8-DME1中目的基因的表达,诱导处理后目的基因表达量逐渐升高,在12 h后达到最高,之后缓慢下降。该载体的成功构建为深入研究DNA去甲基化与植物的生殖发育调控奠定了基础。     

甬优17机插种植表现及高产配套技术

通过试验以及高产示范,分析了不同育秧基质和水稻壮秧剂用量对机插稻秧苗的影响,以及不同机插密度的增产效果。小结了甬优17机插栽培的种植表现和高产栽培技术。     

Vermicomposting leachate as liquid fertilizer for the cultivation of sugarcane (Saccharum sp.)

In vermicomposting, the main product is the worm casts, but a leachate is generated that contains large amounts of plant nutrients. This leachate is normally diluted to avoid plant damage. We investigated how dilution of vermicompost leachate combined with different concentrations of nitrogen (N) - phosphorus (P) - potassium (K) triple 17 fertilizer, and polyoxyethylene tridecyl alcohol as dispersant and polyethylene nonylphenol as adherent to increase efficiency of fertilizer uptake, affected sugarcane plant development. The vermicomposting leachate with pH 7.8 and electrolytic conductivity 2.6 dS m^?1, contained 834 mg potassium (K) l^?1, 247 mg nitrate (NO₃^?) l^?1 and 168 mg phosphate (PO₄^3?) l^?1, was free of pathogens and resulted in a 65% germination index. Vermicompost leachate did not inhibit sugarcane growth and mixed with 170 g l^?1 NPK triple 17 fertilizer resulted in the best plant development. No dispersant or adherent was required to improve plant height and stem development.     

虹鳟IL-17多克隆抗体的制备及初步鉴定

本研究根据NCBI已发表序列设计引物,提取经植物血凝素刺激后的虹鳟Oncorhynchus mykiss头肾细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增IL-17成熟肽基因,测序结果表明所获得的序列与发表序列相一致。将该基因重组至原核表达载体pET32a中,并转化大肠杆菌Escherichia coli Rosetta,进行诱导表达。SDS-PAGE电泳结果表明:目的蛋白以包涵体形式表达,大小约为32k Da,重组蛋白经Ni-NTA系统纯化、复性后纯度达90%以上,以其免疫小鼠制备虹鳟IL-17多克隆抗体。ELISA结果显示其效价为1∶25 600,而间接免疫荧光结果显示所制备的多克隆抗体能够特异性地识别真核细胞中瞬时表达的虹鳟IL-17。本研究成功制备虹鳟IL-17多克隆抗体,为下一步IL-17在虹鳟黏膜免疫中的作用及其佐剂效应研究奠定基础。     

福州市主要公园乔木树种多样性分析

对福州市4个主要公园的乔木种类和各树种的个体数量进行调查,采用α多样性指数对各个公园乔木树种的调查结果进行分析,并应用二元属性数据的β多样性指数对各个公园乔木树种的多样性进行了初步研究。结果表明:4个公园内有乔木树种共196种,隶属54科97属;Simpson生态优势度指数表现为:闽江公园北园>闽江公园南园>温泉公园>西湖公园;Shannon-Wiener多样性指数表现为:闽江公园北园>温泉公园>闽江公园南园>西湖公园;Pielou均匀度指数表现为:闽江公园南园>闽江公园北园>温泉公园>西湖公园;Whittaker多样性指数表现为:温泉公园>闽江公园北园>西湖公园>闽江公园南园;Sorenson相似度指数表现为:闽江公园南园和温泉公园的Sorenson相似度指数最小,为0.39535,闽江公园北园和闽江公园南园最大,为0.63514。     

长期干旱胁迫下Mdm-miR160- MdARF17- MdHYL1模块调控苹果生长发育的研究

为了研究长期干旱条件下Mdm-miR160-MdARF17-MdHYL1 调控网络在苹果生长发育中的作用，以GL-3和Mdm-miR160e OE、MdARF17 RNAi、MdmARF17 OE、 MdHYL1 OE及MdHYL 1 RNAi转基因苹果为试验材料，进行为期3个月的长期干旱处理，测定苹果株高、根干质量、根冠比以及叶片净光合速率、胞间CO₂浓度、气孔导度、蒸腾速率、叶绿素荧光值和水分利用效率。结果表明，在长期干旱胁迫下， Mdm-miR160e OE转基因苹果植株更矮化，根冠比、根干质量、光合能力及水分利用效率大于GL-3植株，具有更强的耐旱性； MdARF17 RNAi植株比GL-3更矮，且具有更大的根冠比、根干质量、光合能力和水分利用效率，而MdARF17 OE与之相反； MdHYL1 RNAi植株对长期干旱胁迫更敏感，其株高大于野生型且具有更小的根冠比、更低的光合能力和水分利用效率，而 MdHYL1 OE植物对长期干旱条件具有更强的适应性，生长发育表型与RNAi植株相反。综上所述，Mdm-miR160- MdARF17-MdHYL1调控网络在苹果响应长期干旱过程中发挥了重要功能，为苹果抗旱分子育种提供了候选基因。     

Assessing sexual maturity of feminized Japanese eel Anguilla japonica by measuring eye size

For efficient production of Japanese eel Anguilla japonica eggs, knowledge of the status of the sexual maturity of potential broodstock females is important because this status directly influences the time required to produce mature eggs by successive hormone doses. Here we apply an eye index (relative eye size) to evaluate the gonadal status of feminized A. japonica, which were induced by administration of estradiol-17β. Examination of gonad somatic and eye indexes of 267 feminized eels, cultivated for 12–56 months, revealed a significant correlation between these two indexes. Artificial maturation of 35 feminized eels showed that the number of hormone injections administered before ovulation was significantly lower as the eye index score increased, indicating availability of this noninvasive method of predicting sexual maturity of feminized eel. There was no correlation between eye index and fertilization rate, hatching rate, or larval survival rate, suggesting that sexual maturity before hormonal treatment does not affect egg quality.     

优质甘蓝型油菜黔油17号亲本原种的保优繁殖技术研究

通过优质甘蓝型油菜隐性核不育系98-116 AB与父本ZW 99004单株成对杂交,并在F1代杂交组合进行配合力测定,获得高配合力的成对株系材料。根据优质杂交油菜新品种黔油17号母本98-116 AB及父本ZW 004的自身特点,分别在人工隔离和自然隔离条件下进行其原原种及原种的保优繁殖技术研究,保证亲本原始的优良种性,确保大面积生产中杂交种的质量以及品种的生产潜力。